Анализ за генна мутация в онкологията

Недребноклетъчен рак на белия дроб (NSCLC)

  • плоскоклетъчен карцином (40% от пациентите)
  • аденокарцином (40-50% от пациентите)
  • едроклетъчен карцином (5-10% от пациентите)

Дребноклетъчен рак на белия дроб (SCLC)

Насочената терапия е основата на лечението на пациенти с NSCLC. Интензивно проучване на точните молекулярни механизми на рака на белия дроб разкри възможността не само селективно да повлияе на патологичната молекулна каскада в туморна клетка, като се използват целеви лекарства, но и да се определи ефикасността / страничните ефекти на класическата химиотерапия и да се предскаже развитието на заболяването и метастатичния потенциал на тумора..

Способността за изследване на свободно циркулиращата туморна ДНК (технология за течна биопсия) отваря нови хоризонти в диагностиката, мониторинга и лечението на рак на белия дроб.

Наскоро генетичното тестване даде възможност да се идентифицират подтипове на белодробен рак с наличието на активиращи мутации в редица онкогени. Най-важните са мутациите в EGFR, BRAF, MET гените и транслокациите, включващи ALK и RET гените. Нарушенията в тези гени са мишена за целенасочена терапия.

За разлика от химиотерапията, която убива всякакви клетки, включително здрави, насочената терапия действа върху раковите клетки по специфичен начин, насочвайки се към конкретна цел. Насочената терапия има много по-малък диапазон от странични ефекти в сравнение със стандартната химиотерапия.

Клинична значимост на изследваното
гени и възможностите за насочване
терапия

Необходимостта от цялостно генетично изследване става очевидна, което позволява еднократна диагностика на всички възможни „мишени“ за целенасочена терапия

Въвеждане на тестове за анализ на мутации, свързани с ефективността на целевите лекарства

Предимствата на NGS метода в сравнение
други методи за намиране на соматични
мутации в тумора

ХАРАКТЕРИСТИКАNGSPCRПОСЛЕДВАНЕ НА СЕНГЕР
Чувствителност (съотношение на мутантния алел в пробата)0.1%1%15-20%
Възможност за определяне на точните координати на мутацията+-+
Способността за изследване на предварително неописани мутации+-+
Възможност за изследване на соматични мутации в плазмата++-

Генни панели

Генните панели ви позволяват да определите наличието на мутации в няколко гена наведнъж, което дава възможност незабавно да изберете оптималното лечение и да направите изследването рентабилно

Основен панел за рак на белия дроб

Основният панел ви позволява да изберете лечение с целеви лекарства за кратко време.

Гени, включени в панела: EGFR, BRAF, KRAS, NRAS

  • Честотата на мутациите в гена на EGFR при белодробен аденокарцином е 25%.
  • Мутацията L858R и делециите на екзон 19 от EGFR гена са свързани с най-големия отговор на лечението с инхибитори на тирозин киназа: гефитиниб, ерлотиниб и афатиниб.
  • Мутациите в гена BRAF се срещат в 4% от случаите на недребноклетъчен рак на белия дроб.
  • Откриването на мутация в гена позволява предписване на лекарства с инхибитор на BRAF: вемурафениб и траметиниб.

Мутации в гените KRAS и NRAS се откриват при почти 30% от пациентите с недребноклетъчен рак на белия дроб. Най-високата честота на мутациите на драйвери е установена в гена KRAS. Мутациите в гените KRAS и NRAS най-често са взаимно изключващи се с мутациите в EGFR гена и транслокациите на ALK гена.

Основният панел за рак на белия дроб предоставя на почти половината от недребноклетъчните пациенти с рак на белия дроб важна информация, която да ръководи бъдещата диагноза и лечение..

Откриването на мутации в гените EGFR и BRAF позволява на пациента да бъде предписана таргетна терапия. В същото време наличието на мутация в гените KRAS и NRAS облекчава пациента от по-нататъшно търсене на транслокации, включващи ALK гена.

Основният панел се изпълнява с помощта на следващо поколение последователност (NGS), което ви позволява да диагностицирате няколкостотин мутации наведнъж с ниска цена.

Цената на изследването на 4 гена по метода NGS съответства на цената на изследването на един ген по метода PCR, а в някои случаи дори и по-евтино.

Заедно с основния панел е възможно да се изпълни
проучвания за транслокация на ALK ген

Изследването на транслокациите, включващи ALK гена, се извършва по метода
флуоресцентна in situ хибридизация или FISH метод

  • Транслокациите, включващи ALK гена, се срещат в 4% от случаите с NSCLC. Откриването на транслокация, включваща ALK гена, позволява предписване на насочени лекарства, ALK тирозин киназа инхибитори кризотиниб, церитиниб.

Основен панел за рак на белия дроб

Основен панел за рак на белия дроб
+ ALK транслокации

Тест за наследствен рак

Онкогенетичният тест в лабораторията на Genetico е проучване, което има доказателствена база.
След като бъдете тествани, ще получите достоверна картина на рисковете от развитие на почти всички форми на наследствен рак, определени чрез мутации в 207 гена. Има редица методи за анализ на предразположението към рак.
Към днешна дата най-надеждният метод за оценка на предразположението е генетичният онкотест.

Резултатите от този анализ са точни и мутациите са надеждно идентифицирани. Отделно си заслужава да се изясни, че популярният тест за туморни маркери е противоречива тестова техника, която в някои случаи дава фалшиво положителни или фалшиво отрицателни резултати. Последното може да доведе до неразумни предписания на лекарства и дори хирургични интервенции без значителни индикации..

Кога генетичният тест за рак е подходящ за вас?

Как върви анализът

Има няколко форми на рак, които се наследяват

Изследователски метод

Метод на изследване - високоефективно ДНК секвениране на ново поколение (следващо поколение последователност, NGS) Секвенирането, тоест определяне на последователността на ДНК нуклеотиди, се отнася до високоточни методи на молекулен анализ. Мутациите в 207 гена се изследват:

ABCB11, ABRAXAS1 (FAM175A), ACD, AIP, AKT1, ALK, ANKRD26, APC, AR, ASCC1, ASXL1, ATM, ATP8B1, ATR, AXIN2, BAP1, BARD1, BLM, BMPR1A, BRAF, BRCA1, IP1 BRCA1, IP1 BRCA1, IP1 BRCA1, IP1 BRCA1, BUB1B, CBL, CDC73, CDH1, CDK4, CDKN1B, CDKN1C, CDKN2A, CEBPA, CEP57, CFTR, CHEK2, CTC1, CTHRC1, CTNNA1, CTRC, CYLD, CYP21A2, DCLREOCK1C, DDC1, DDC1, EGFR, EGLN1, ELAC2, ELANE, EPCAM, ERBB2, ERCC1, ERCC2, ERCC3, ERCC4, ERCC5, ERTV5, ETV6, EXT1, EXT2, EZH2, FANCA, FANCB, FANCC, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCI, FANC, FANCI, FAS, FASLG, FH, FLCN, GALNT12, GATA2, GEN1, GNAS, GPC3, GREM1, HNF1A, HNF1B, HOXB13, HRAS, IFNGR1, IKZF1, JAK2, JAK3, KDR, KIF1B, KIT4, KRAS, LIG1, MC1R, MEN1, MET, MITF, MLH1, MLH3, MRE11, MSH2, MSH3, MSH6, MSR1, MUTYH, NBN, NF1, NF2, NHEJ1, NHP2, NOP10, NRAS, NSD1, NTHL1, PALB2, PALLX5, PARNX, PARN5, PARN5, PDGFRA, PDGFRB, PHOX2B, PIK3CA, PIK3CD, PIK3R1, PMS1, PMS2, POLD1, POLE, POLH, POT1, PRF1, PRKAR1A, PRSS1, PTCH1, PTCH2, PTEN, PTPN11, RAD50, RAAD51, RADAD51, RADAD51, RAD51, RAD51 AL1, RB1, RECQL, RECQL4, REST, RET, RHBDF2, RINT1, RNASEL, RNF43, RPS20, RRAS, RTEL1, RUNX1, SAMD9L, SBDS, SCG5, SDHA, SDHAF2, SDHB, SDHC, SDHD, SECA23B, SH2 SLX4, SMAD4, SMARCA4, SMARCB1, SMARCE1, SOS1, SOS2, SPINK1, SPRED1, SRGAP1, SRP72, STAT3, STK11, SUFU, TERC, TERT, TINF2, TJP2, TMEM127, TP53, TSCBD, TSCHT2 WAS, WNT10A, WRAP53, WRN, WT1, XPA, XPC, XRCC2, XRCC

Правим анализа
в рекордно време

Анализ на гените BRCA1 и BRCA2 за откриване на синдрома на наследствен рак на гърдата и яйчниците

Един от най-често срещаните видове фамилни тумори е наследствен рак на гърдата (BC), който представлява 5-10% от всички случаи на злокачествени лезии на гърдата. Наследственият рак на гърдата често е свързан с висок риск от рак на яйчниците (ОК). Като правило в научната и медицинската литература се използва единен термин „синдром на рак на яйчниците“. Освен това при туморни заболявания на яйчника делът на наследствения рак е дори по-висок, отколкото при рак на гърдата: 10-20% от случаите на ОЦ се дължат на наличието на наследствен генетичен дефект.

Предразположението към появата на BC / OC синдром е свързано с наличието на мутации в гените BRCA1 или BRCA2 при такива пациенти. Мутациите са наследствени - тоест буквално във всяка клетка на тялото на такъв човек има щети, които са били наследени от него. Вероятността от злокачествено новообразувание при пациенти с мутации BRCA1 или BRCA2 достига 80% до 70-годишна възраст.

Гените BRCA1 и BRCA2 играят ключова роля за поддържането на целостта на генома, по-специално в процесите на възстановяване (възстановяване) на ДНК. Мутациите, засягащи тези гени, обикновено водят до синтеза на пресечен, неправилен протеин. Такъв протеин не може правилно да изпълнява функциите си - да "следи" стабилността на целия генетичен материал на клетката.

Във всяка клетка обаче има по две копия на всеки ген - от мама и от татко, така че второто копие може да компенсира нарушаването на клетъчните системи. Но вероятността за неговия провал също е много голяма. Ако процесите на възстановяване на ДНК са нарушени, в клетките започват да се натрупват други промени, което от своя страна може да доведе до злокачествена трансформация и растеж на тумора..

Определяне на генетичната предразположеност към рак:

Въз основа на лабораторията по молекулярна онкология, N.N. N.N. Петров, стъпка по стъпка анализ се използва за пациенти:

  1. първо се изследва наличието на най-честите мутации (4 мутации)
  2. при липса на такава и клинична необходимост е възможно да се извърши разширен анализ (8 мутации) и / или анализ на цялата последователност на гените BRCA1 и BRCA2.

В момента са известни повече от 2000 варианта на патогенни мутации в гените BRCA1 и BRCA2. В допълнение, тези гени са доста големи - съответно 24 и 27 екзона. Следователно, пълен анализ на последователността на гените BRCA1 и BRCA2 е трудоемък, скъп и отнемащ време процес..

Някои националности обаче имат ограничен набор от значителни мутации (т. Нар. „Ефект на основателя“). Така в популацията на руски пациенти от славянски произход до 90% от откритите патогенни варианти на BRCA1 са представени само от три мутации: 5382insC, 4153delA, 185delAG. Този факт дава възможност за значително ускоряване на генетичното изследване на пациенти със признаци на наследствен рак на гърдата / OC..

Анализ на BRCA2 генната последователност, идентифициране на c.9096_9097delAA мутация

Кога трябва да се тествате за мутации BRCA1 и BRCA2??

Националната всеобхватна ракова мрежа (NCCN) препоръчва следните пациенти да бъдат насочени за генетично изследване:

  1. Пациенти под 45 години с диагноза рак на гърдата
  2. Пациенти под 50-годишна възраст с рак на гърдата, ако в семейството има поне един близък роднина с такава диагноза
  3. Също така, ако пациент под 50 години с рак на гърдата няма фамилна анамнеза за онкология
  4. Ако множество лезии на млечните жлези се диагностицират преди 50-годишна възраст
  5. Пациенти с рак на гърдата под 60-годишна възраст - ако според резултатите от хистологичното изследване туморът е три-отрицателен (няма израз на маркери ER, PR, HER2).
  6. Ако е диагностициран рак на гърдата на всяка възраст - ако е налице поне един от следните признаци:
    • поне 1 близък роднина с рак на гърдата на възраст под 50 години;
    • поне 2 близки роднини с рак на гърдата на всяка възраст;
    • поне 1 близък роднина с OC;
    • наличието на поне 2 близки роднини с рак на панкреаса и / или рак на простатата;
    • имащи роднини от мъжки пол с рак на гърдата;
    • принадлежност към население с висока честота на наследствени мутации (например ашкенази евреи);
  7. Всички пациенти с диагноза рак на яйчниците.
  8. Ако мъжът е диагностициран с рак на гърдата.
  9. Ако се диагностицира рак на простатата (с оценка на Gleason> 7) с поне един роднина с OC или BC на възраст под 50 години, или ако има поне двама роднини с BC, рак на панкреаса или рак на простатата.
  10. Ако сте били диагностицирани с рак на панкреаса, ако имате поне един роднина с ОЦ или БК на възраст под 50 години, или ако имате поне двама роднини с рак на гърдата, рак на панкреаса или рак на простатата.
  11. Ако ракът на панкреаса се диагностицира при индивид, принадлежащ към еврейската етническа група Ашкенази.
  12. Ако роднина има мутация BRCA1 или BRCA2

Изпълнението на молекулярно-генетичния анализ трябва да се придружава от генетично консултиране, по време на което се обсъждат съдържанието, значението и последиците от тестването; значението на положителните, отрицателните и неинформативните резултати; технически ограничения на предложения тест; необходимостта от информиране на близките в случай на наследствена мутация; особености на скрининг и профилактика на тумори при носители на мутации и др..

Как да се тестваме за мутации BRCA1 и BRCA2?

Материалът за анализ е кръв. За генетични изследвания се използват EDTA епруветки (лилава капачка). Можете да дарите кръв в лабораторията на Националния медицински изследователски център или да я донесете от всяка друга лаборатория. Кръвта се съхранява при стайна температура до 7 дни.

Не е необходима специална подготовка за изследването, резултатите от изследването не се влияят от хранене, лекарства, прилагане на контрастни вещества и др..

Няма да е необходимо да извършвате повторно теста след известно време или след лечението. Наследената мутация не може да изчезне или да се появи по време на живота или след получаване на лечение.

Какво да направите, ако жената има мутация на BRCA1 или BRCA2?

За носители на патогенни мутации е разработен набор от мерки за ранна диагностика, профилактика и лечение на новообразувания на гърдата и рак на яйчниците. Ако сред здравите жени е своевременно да се идентифицират онези, които имат генен дефект, е възможно в ранните етапи да се диагностицира развитието на болестта.

Изследователите са установили специфичните особености на чувствителността към лекарства на тумори, свързани с BRCA. Те реагират добре на някои цитотоксични лекарства и лечението може да бъде много успешно..

За здрави носители на BRCA мутации се препоръчва:

  1. Месечен самостоятелен преглед от 18-годишна възраст
  2. Клиничен преглед на млечните жлези (мамография или магнитен резонанс) от 25-годишна възраст.
  3. Мъжките носители на мутацията на гена BRCA1 / 2 се препоръчват да преминат годишно клинично изследване на млечните жлези, като се започне от 35-годишна възраст. От 40-годишна възраст е препоръчително да се извърши скринингов преглед на простатната жлеза.
  4. Дерматологични и офталмологични прегледи за ранна диагностика на меланом.

Как се наследява предразположението към рак на гърдата и рак на яйчниците.

Често носителите на мутации BRCA1 / BRCA2 имат въпрос - предаден ли е на всички деца и какви са генетичните причини за наследствената форма на рак на гърдата? Шансовете за преминаване на увреден ген на потомство са 50%.

Заболяването се наследява еднакво както от момчета, така и от момичета. Генът, свързан с развитието на рак на гърдата и яйчниците, не е разположен върху половите хромозоми, така че вероятността от пренасяне на мутацията не зависи от пола на детето.

Ако мутацията е предадена чрез мъже през няколко поколения, е много трудно да се анализира родословието, тъй като мъжете доста рядко получават рак на гърдата, дори с генен дефект.

Например: дядото и бащата на пациента са били носители и те не са развили болестта. На въпроса дали има случаи на рак в семейството, такъв пациент ще отговори отрицателно. При липса на други клинични признаци на наследствени тумори (ранна възраст / множественост на туморите), наследственият компонент на заболяването може да не се взема предвид.

Ако бъде открита мутация на BRCA1 или BRCA2, всички кръвни роднини се препоръчват също да бъдат изследвани.

Защо е важно да се вземат предвид етническите корени в генетичните изследвания??

Много етнически групи имат свой набор от чести мутации. Националните корени на темата трябва да се вземат предвид при избора на дълбочината на изследването.

Учените са доказали, че някои националности се характеризират с ограничен диапазон от значителни мутации (така нареченият „ефект на основателя“). Така в популацията на руски пациенти от славянски произход до 90% от откритите патогенни варианти на BRCA1 са представени само от три мутации: 5382insC, 4153delA, 185delAG. Този факт дава възможност за значително ускоряване на генетичното изследване на пациенти със признаци на наследствен рак на гърдата / OC..

И в заключение визуална инфографика „Синдром на наследствен рак на гърдата и яйчниците“. Автор - Кулигина Екатерина Шотовна, д-р, старши научен сътрудник на Научната лаборатория по молекулярна онкология на Федералната държавна бюджетна институция „Национален медицински изследователски център по онкология. N.N. Петров “Министерство на здравеопазването на Русия.

Авторска публикация:
АЛЕКСАХИНА СВЕТЛАНА НИКОЛАЕВНА,
лаборант-изследовател на научната лаборатория по молекулярна онкология на N.N. N.N. Петров “Министерство на здравеопазването на Русия

Предупредени и въоръжени: генетични изследвания в онкологията

Трима експерти по онкология за рак, наследственост и генетични тестове.

Онкологичните заболявания отнемат милиони животи всяка година. Сред причините за смъртта ракът е на второ място след сърдечно-съдови заболявания и определено на първо място по отношение на страха, който го съпътства. Тази ситуация е възникнала поради схващането, че ракът е труден за диагностициране и почти невъзможно да се предотврати..

Въпреки това, един от десет случая на рак е проява на мутации в нашите гени от раждането. Съвременната наука ви позволява да ги хванете и значително да намалите риска от заболяване..

Експертите по онкология ви казват какво е ракът, колко силно сме засегнати от наследствеността, кой е показан за генетично изследване като превантивна мярка и как може да помогне, ако ракът вече е открит.

Прочетете също:

Ракът по същество е генетично разстройство. Мутациите, които причиняват рак, или се наследяват, и тогава те присъстват във всички клетки на тялото, или се появяват в някаква тъкан или определена клетка. Човек може да наследи от родителите си определена мутация в ген, която предпазва от рак, или мутация, която сама по себе си може да доведе до рак..

Ненаследствените мутации се срещат в първоначално здрави клетки. Те се причиняват от външни канцерогенни фактори, като пушене или ултравиолетово лъчение. Най-вече ракът се развива при хора в зряла възраст: процесът на възникване и натрупване на мутации може да отнеме повече от десетина години. Хората вървят по този път много по-бързо, ако още при раждането са наследили срив. Следователно, при туморните синдроми, ракът се появява в много по-млада възраст..

Тази пролет беше публикувана чудесна статия в Science - за случайни грешки, които възникват по време на удвояването на молекулите на ДНК и са основният източник на онкогенни мутации. Рак като рак на простатата може да допринесе до 95%.

Най-често причината за рака са именно не-наследствени мутации: когато човек не е наследил никакви генетични сривове, но по време на живота, в клетките се натрупват грешки, които рано или късно водят до появата на тумор. По-нататъшното натрупване на тези разрушения вече вътре в тумора може да го направи по-злокачествено или да доведе до появата на нови свойства..

Въпреки факта, че в повечето случаи ракът се появява поради случайни мутации, човек трябва да приеме наследствения фактор много сериозно. Ако човек знае за наследствените мутации, които има, той ще бъде в състояние да предотврати развитието на специфично заболяване, рискът от което той е много висок.

Има тумори с ясно изразен наследствен фактор. Това са например рак на гърдата и рак на яйчниците. До 10% от тези ракови заболявания са свързани с мутации в гените BRCA1 и BRCA2. Най-разпространеният вид рак сред нашето мъжко население - рак на белите дробове, се причинява най-вече от външни фактори и по-точно от тютюнопушенето. Но ако приемем, че външните причини са изчезнали, тогава ролята на наследствеността би станала приблизително същата като при рака на гърдата. Тоест, в относително съотношение за рак на белия дроб, наследствените мутации са доста слабо видими, но в абсолютни числа все още са доста значими.

В допълнение, наследственият компонент се проявява доста значително в рак на стомаха и панкреаса, рак на дебелото черво и мозъчни тумори..

Повечето от раковите заболявания се появяват поради комбинация от случайни събития на клетъчно ниво и външни фактори. В 5-10% от случаите обаче наследствеността играе предопределяща роля за появата на рак..

Представете си, че една от онкогенните мутации се появи в зародишната клетка, която имаше късмет да се превърне в човек. Приблизително 40 трилиона клетки на този човек (както и неговите потомци) ще съдържа мутацията. Следователно всяка клетка ще трябва да акумулира по-малко мутации, за да се превърне в рак, а рискът от заразяване с определен вид рак в носител на мутацията ще бъде значително по-висок..

Повишеният риск от рак се предава от поколение на поколение заедно с мутацията и се нарича наследствен туморен синдром. Туморните синдроми са доста чести - при 2-4% от хората и причиняват 5-10% от случаите на рак.

Благодарение на Анджелина Джоли, най-известният туморен синдром се превърна в наследствен рак на гърдата и яйчниците, който се причинява от мутации в гените BRCA1 и BRCA2. При жени с този синдром рискът от развитие на рак на гърдата е 45-87%, докато средната вероятност от това заболяване е много по-ниска - 5,6%. Вероятността от развитие на рак в други органи също се увеличава: яйчниците (от 1 до 35%), панкреаса, а при мъжете също и простатната жлеза.

Почти всяко онкологично заболяване има наследствени форми. Има туморни синдроми, които причиняват рак на стомаха, червата, мозъка, кожата, щитовидната жлеза, матката и други по-рядко срещани видове тумори..

Пренасянето на синдрома може да се определи с помощта на генетичен тест и следните характеристики на фамилната анамнеза ще покажат, че трябва да вземете теста.

Няколко случая на един и същ рак в семейство;

Болести в ранна възраст за тази индикация (за повечето показания - преди 50 години);

Единичен случай на определен вид рак (например рак на яйчниците);

Рак във всеки от сдвоените органи;

Повече от един вид рак при роднина.

Прочетете също:

Ако нещо от горното е често срещано в семейството ви, трябва да се консултирате с генетик, който ще определи дали има медицински показания за вземане на генетичен тест. Носителите на наследствени туморни синдроми трябва да бъдат внимателно изследвани за рак, за да се открие рак на ранен етап. А в някои случаи рискът от развитие на рак може да бъде значително намален с помощта на превантивна хирургия и превенция на лекарства..

Въпреки факта, че наследствените туморни синдроми са много чести, западните национални здравни системи все още не са въвели генетични тестове за пренасяне на мутации в широко разпространена практика. Тестовете се препоръчват само ако има конкретна фамилна анамнеза, която показва специфичен синдром, и само ако е известно, че тестването може да бъде от полза за човека.

За съжаление, този консервативен подход пренебрегва много носители на синдромите: твърде малко хора и лекари подозират наличието на наследствени форми на рак; висок риск от заболяването не винаги се появява в семейната история; много пациенти не знаят за болестите на своите близки, дори когато има кой да попита.

Освен това правото да преценят каква е ползата, какво е вредата и как те се отнасят един към друг, лекарите оставят изключително на себе си. Медицинските знания са същата намеса в светския живот като хапчета и операции и следователно мярката на знанието трябва да се определя от професионалисти в леки дрехи, в противен случай каквото и да се случи.

И аз като моите колеги вярвам, че правото да знаят за собственото си здраве принадлежи на хората, а не на медицинската общност. Правим генетичен тест за наследствени туморни синдроми, така че тези, които искат да научат за рисковете си от рак, да могат да упражнят това право и да поемат отговорност за собствения си живот и здраве..

Докато ракът се развива, клетките се променят и губят първоначалния си генетичен „вид“, наследен от родителите си. Следователно, за да се използват молекулните характеристики на рака за лечение, не е достатъчно да се изследват само наследствени мутации. За да разберете слабите точки на тумора, трябва да извършите молекулярно изследване на проби, получени в резултат на биопсия или хирургия.

Нестабилността на генома позволява на тумора да натрупва генетични аномалии, които могат да бъдат полезни за самия тумор. Те включват мутации в онкогени - гени, които регулират деленето на клетките. Такива мутации могат да умножат активността на протеините, да ги направят нечувствителни към инхибиращи сигнали или да предизвикат повишено производство на ензими. Това води до неконтролирано клетъчно делене и впоследствие до метастази..

какво е насочена терапия

Прочетете също:

Някои мутации имат известни ефекти: знаем точно как променят структурата на протеините. Това прави възможно разработването на лекарствени молекули, които ще действат само върху туморните клетки и в същото време няма да унищожат нормалните клетки в организма. Тези лекарства се наричат ​​насочени лекарства. За да работи съвременната таргетна терапия, трябва да знаете какви са мутациите в тумора, преди да предпишете лечение..

Тези мутации могат да се различават дори в рамките на един и същ вид рак (нозология) при различни пациенти и дори при тумор на същия пациент. Ето защо за някои лекарства се препоръчва молекулно-генетично изследване в инструкциите за лекарството..

Днес в световен мащаб се провеждат над 30 000 изследвания на противораково лечение. Според различни източници, до половината от тях използват молекулярни биомаркери за записване на пациенти в изследване или за проследяване по време на лечението..

Но какво дава молекулното профилиране на пациента? Къде е мястото й в клиничната практика днес? Въпреки че тестването е задължително за редица лекарства, това е само върхът на айсберга на съвременните възможности за молекулно тестване. Резултатите от изследванията потвърждават влиянието на различни мутации върху ефективността на лекарствата, а някои от тях могат да бъдат намерени в препоръките на международните клинични общности..

Известни са обаче поне 50 допълнителни гена и биомаркери, чийто анализ може да бъде полезен при избора на лекарствена терапия (Chakravarty et al., JCO PO 2017). Тяхното определяне изисква използването на съвременни методи за генетичен анализ, като последователност с висока пропускателна способност (NGS). Последователността ви позволява да откриете не само общи мутации, но и "прочетете" пълната последователност от клинично значими гени. Това ви позволява да идентифицирате всички възможни генетични промени..

На етапа на анализ на резултатите се използват специални биоинформатични методи, които помагат да се идентифицират отклонения от нормалния геном, дори ако в малък процент от клетките настъпи важна промяна. Тълкуването на получения резултат трябва да се основава на принципите на медицина, основана на доказателства, тъй като очакваният биологичен ефект не винаги се потвърждава в клинични изпитвания..

Поради сложността на процеса на провеждане на изследвания и интерпретация на резултатите, молекулярното профилиране все още не се е превърнало в "златен стандарт" в клиничната онкология. Има обаче ситуации, при които този анализ може значително да повлияе на избора на лечение..

Стандартните възможности за терапия са изчерпани

За съжаление, дори на фона на правилно подбрано лечение, болестта може да прогресира и не винаги има избор на алтернативна терапия в рамките на стандартите за даден рак. В този случай молекулярното профилиране може да разкрие "цели" за експериментална терапия, включително в клинични изпитвания (напр. TAPUR).

спектърът на потенциално значимите мутации е широк

Прочетете също:

Някои видове рак, като недребноклетъчен белодробен рак или меланом, са известни с много генетични промени, много от които могат да бъдат мишени за насочени терапии. В този случай молекулярното профилиране може не само да разшири избора на възможности за лечение, но и да помогне за приоритет на подбора на лекарството..

Редки тумори или тумори с първоначално лоша прогноза

Молекулярното изследване в такива случаи помага да се определи на началния етап по-пълен набор от възможни възможности за лечение..

Молекулярното профилиране и персонализацията на лечението изискват сътрудничество от специалисти от няколко области: молекулярна биология, биоинформатика и клинична онкология. Следователно подобно изследване по правило е по-скъпо от конвенционалните лабораторни изследвания и стойността му във всеки конкретен случай може да се определи само от специалист..

Молекулярна диагноза на рак

Молекулярно-генетичното изследване е неразделна част от изследването и лечението на пациенти с рак по целия свят.

Причината за появата на тумор е мутация, т.е. генетични нарушения, възникнали в една от милиардите клетки в човешкото тяло. Тези мутации нарушават нормалното функциониране на клетките, което води до техния неконтролиран и неограничен растеж, размножаване и разпространение в тялото - метастази. Наличието на такива мутации обаче позволява да се разграничат туморните клетки от здравите и да се използват тези знания при лечението на пациенти..

Анализът на тумора на всеки отделен пациент и формирането на индивидуален списък на потенциални целеви молекули стана възможно благодарение на въвеждането на техники за молекулно-генетичен анализ в клиничната практика. Научна лаборатория по молекулярна онкология, Национален медицински изследователски център по онкология. N.N. Петрова извършва пълен набор от съвременни молекулярно-генетични изследвания за онкоболни и техните близки.

Кой може да се възползва от генетичните изследвания и как?

  • Пациентите с установена онкологична диагноза - ще помогнат за избора на ефективна лекарствена терапия.
  • Пациенти под 50 години с диагноза рак на гърдата, рак на яйчниците, рак на стомаха или рак на панкреаса - определят дали има онкологично предразположение и коригират лечението.
  • Здрави хора с неблагоприятна фамилна "онкологична анамнеза" - да определят наличието на онкологично предразположение и предварително да предприемат превантивни мерки за ранно откриване на тумора.

Национален медицински изследователски център по онкология. N.N. Петрова извършва пълен набор от дейности, свързани с диагностицирането на наследственото предразположение към рак на гърдата.

Всеки човек е носител на някакъв вид мутации, които са опасни или за нас, или за потомството. Първият ред на научната онкогенетика е идентифицирането на наследствени мутации с помощта на геномно секвениране. Второто направление е изследването на самия тумор, спектъра на мутациите, придобити от клетката, във връзка с които е възникнал. Това също изисква изследване на генома на целия организъм, за да се сравни ДНК последователността на тумора с ДНК последователността в тялото. Следователно в бъдеще ще се изисква лечение на всеки тумор..

Молекулярно-генетичните изследвания могат да се правят дистанционно

За да се подложи на генетичен преглед в N.N. N.N. Петров не трябва да идва в Санкт Петербург. Изследователската лаборатория по молекулярна онкология приема изследователски материали по пощата. Можете да изпратите пратка с писмо или колетна поща както по пощата на Русия (средно време за доставка - 2 седмици), така и с експресна поща (срок на доставка 2-3 дни).

Моля, прочетете внимателно информацията за това къде и как да изпращате биологични материали, за да могат безопасно да стигнат до N.N. N.N. Петров, както и как да платите за изследвания и да получите резултат:

Материали, необходими за изследване:

  • всички патоморфологични материали: парафинови блокове и очила. Ако качеството на резените е лошо или за разкриване на важни детайли, може да е необходимо допълнително нарязване;
  • дезоксигенирана кръв.

Документи, които трябва да бъдат включени в пощенската пратка:

  • сезиране за молекулно-генетични изследвания, завършено от лекар
  • Насока за молекулярно генетично изследване на туморен материал
  • Препратка за анализ на наследствени мутации в гените BRCA1 / 2 (стандартни и разширени анализи на наследствени мутации)
  • Препратка за анализ на наследствени мутации (анализ на пълната последователност на гени BRCA1 / 2 и други)
  • Копия на паспорти на пациент и платец - разпространява се с основна информация + регистрация (необходима за предоставяне на разписка за плащане)
  • Информация за връзка:
    - номер на мобилен телефон (за SMS-уведомление за готовност за анализ)
    - имейл адрес (за изпращане на резултата по имейл)
  • копие от резюмето или консултативното становище за освобождаване от отговорност (ако има такова)
  • копие от хистологичния доклад на предоставения материал (ако има такъв)

Цените за молекулярно-генетични изследвания са посочени в ценовата листа.

За какви молекулярно-генетични изследвания е необходима кръвта на пациента:

  • наследствени мутации (BRCA1,2 и т.н.)
  • полиморфизъм UGT1A1 * 28
  • откриване на кодексиране 1p / 19q + блокове и очила
  • потвърждение на принадлежността на патоморфологичния материал към пациента

Характеристики на изпращане на епруветки за кръв:

  • Необходимият обем на венозна кръв е 3-5 ml.
  • Вземане на кръв може да се направи по всяко време на деня, независимо от храненето.
  • Кръвта се изтегля в епруветки с EDTA (лилава капачка).
  • За смесване на кръв с антикоагулант, който покрива вътрешността на епруветката, затворената тръба трябва леко да се обърне с главата надолу няколко пъти..
  • При стайна температура епруветка с кръв може да се транспортира в рамките на две седмици.

Важно! Не забравяйте да включите документи в колета. Не забравяйте да оставите своя телефонен номер и имейл адрес.

Рак на гърдата и яйчниците - основен

Информация за проучване

Съставът на генетичния комплекс:

  1. Рак на гърдата 1 (BRCA1). Полиморфизъм: 5382InsC
  2. Рак на гърдата 1 (BRCA1). Полиморфизъм: 4153DelA
  3. Рак на гърдата 2 (BRCA2). Полиморфизъм: 6174DelT
  4. Рак на гърдата 1 BRCA1: 185delAG
  5. Рак на гърдата 1 BRCA1: 3819delGTAAA
  6. Рак на гърдата 1 BRCA1: 3875delGTCT
  7. Рак на гърдата 1 BRCA1: 300 T> G (Cys61Gly)
  8. Рак на гърдата 1 BRCA1: 2080delA

Ракът на гърдата е най-често срещаният рак при жените. Така че в Русия от всички жени с рак всеки пети (21%) има тази патология - рак на гърдата.
Всяка година повече от 65 хиляди жени чуват ужасна диагноза, от която над 22 хиляди умират. Въпреки че е възможно напълно да се отървете от болестта в ранните етапи в 94% от случаите. Този комплекс включва идентифициране на мутации в гените BRCA1 и BRCA2.

Рак на гърдата и наследственост:

Ракът на гърдата е рисков фактор в семейната история в продължение на много години. Преди около сто години бяха описани случаи на фамилен рак на гърдата, предаван от поколение на поколение. Някои семейства имат само рак на гърдата; други видове рак се появяват при други.
Около 10-15% от случаите на рак на гърдата са наследствени. Рискът от развитие на рак на гърдата за жена, чиято майка или сестра са имали заболяването е 1,5-3 пъти по-висок от този на жени, чието пряко семейство не е имало рак на гърдата.
Ракът на гърдата се счита за най-изследвания рак в световен мащаб. Всяка година се появява нова информация за същността на това онкологично заболяване и се разработват методи за лечение..

BRCA1 и BRCA2 гени:

В началото на 90-те BRCA1 и BRCA2 са идентифицирани като предразполагащи гени за рак на гърдата и яйчниците.
Наследствените мутации в гените BRCA1 и BRCA2 водят до повишен риск от развитие на рак на гърдата през целия живот. И двата гена са свързани с осигуряване стабилността на генома или по-скоро с механизма на хомоложна рекомбинация за възстановяване на двуверижна ДНК..
В допълнение към рака на гърдата мутациите в гена BRCA1 се появяват при рак на яйчниците, като и двата вида тумори се развиват в по-ранна възраст, отколкото при не-наследствен рак на гърдата.

Свързаните с BRCA1 тумори обикновено се свързват с лоша прогноза за пациента, тъй като най-често се наричат ​​тройно-отрицателен рак на гърдата. Този подтип е наречен така поради липсата на експресия на три гена в туморни клетки наведнъж - HER2, естрогенни и прогестеронови рецептори, следователно, лечението въз основа на взаимодействието на лекарства с тези рецептори е невъзможно.
BRCA2 генът също участва в възстановяването на ДНК и поддържането на стабилността на генома, отчасти заедно с комплекса BRCA1 и отчасти чрез взаимодействия с други молекули..

Мутации, характерни за определени общности и географски групи, са описани и за жителите на страната ни. Така в Русия мутациите на BRCA1 са представени главно от пет вариации, 80% от които са 5382 инC. Мутациите в гените BRCA1 и BRCA2 водят до хромозомна нестабилност и злокачествена трансформация на клетки на гърдата, яйчниците и други органи.

Риск от рак на гърдата при жени с мутации BRCA1 и BRCA2:

Жените, които са носители на мутации в един от гените BRCA1 и BRCA2, имат по-висок риск от развитие на рак на гърдата и рак на яйчниците (по-рядко други видове рак) от останалите..
Трябва да се подчертае, че степента на риск от развитие на рак на гърдата варира в зависимост от семейната история. Рискът от повторно заразяване с рак на гърдата при жена, която е носител на мутацията, която вече е имала рак на гърдата, е 50%. Рискът от развитие на рак на яйчниците при носители на мутация в гена BRCA1 е 16-63%, а при носители на мутация в гена BRCA2 - 16-27%.

Показания за целта на изследването:

  • Като част от програма за скрининг и профилактика на рак на гърдата, за да се установи вероятността от наследствено предразположение.
  • Жени, чиито роднини са открили мутация в един от гените.
  • Жени с фамилна анамнеза за рак на гърдата или яйчниците.
  • Жени, които са имали рак на гърдата преди 50-годишна възраст или са имали двустранен рак на гърдата.
  • Жени с рак на яйчниците.

Морфологична диагноза на тумори: изместване към молекулярно-генетичен анализ

Александър Иванцов, кандидат на медицинските науки,
Максим Клечев, кандидат на медицинските науки,
Екатерина Кулигина, кандидат на биологичните науки,
Национален медицински изследователски център по онкология. Н. Н. Петрова, Министерство на здравеопазването на Руската федерация (Санкт Петербург)
„Природа“ № 6, 2018г

Диагностиката на онкологичните заболявания започва с морфологичен анализ на фрагмент от засегнатия орган, който е фиксиран във формалин, дехидратиран в алкохоли с възходяща плътност и вграден в парафин. Тази процедура ви позволява да направите 3-микронна секция и да я поставите върху стъкло, след това да оцветите ядрата на клетките и други базофилни структури с ярко синьо алкално багрило с хематоксилин, а цитоплазмата с розово кисело багрило еозин. Оцветяването ви позволява ясно да визуализирате основните елементи на клетката. Тогава микроскопичният "пейзаж" на изследваната проба се сравнява с референтния, върху който се фиксира хистологичната структура, характерна за определен анатомичен регион. Наличието на инвазивен неопластичен процес се доказва от загубата на типична хистоархитектоника и клетъчни молекулни структури, наличието на полиморфни неорганизирани клетки (фиг. 1).

Фиг. 1. Рак на дебелото черво: загуба на типична хистологична структура по време на неопластичния процес

Освен установяването на самия факт на злокачествена трансформация, за да се предпише индивидуализиран терапевтичен режим, е важно да се определи хистологичният тип на тумора възможно най-рано и да се оценят стандартните маркери на агресивност (степен на диференциация, митотична активност и др.). В рамките на един орган може да се развие патологичен процес според напълно различни сценарии, включващи различни клетки и структури. Например, сред злокачествените новообразувания на белия дроб, според съвременните концепции, има повече от шест хистологични типа, всеки от които изисква свои собствени терапевтични подходи (фиг. 2) [1]. Дребноклетъчният белодробен рак се характеризира с бърз ход, ранни метастази и много лоша прогноза. Карциноидните тумори, произхождащи от клетки на дифузната невроендокринна система, имат най-добра прогноза; това е единственият вид карцином на белия дроб, който в момента се смята, че няма връзка с тютюнопушенето. Белодробният саркома е агресивен тумор, който се е развил от клетките на съединителнотъканните структури на белия дроб. Аденокарциномите се състоят предимно от жлезисти клетки и са периферно локализирани. Този вид тумор често се развива при непушачи. Те могат да носят активиращи мутации в гените EGFR, ALK и ROS1, които са терапевтична цел за действието на целеви лекарства - тирозин киназни инхибитори..

Фиг. 2. Хистологични видове рак на белия дроб: дребноклетъчен рак (14%); плоскоклетъчен (епидермоиден) рак (20%); аденокарцином (38%); едроклетъчен карцином (3%); карциноид (5%); мезенхимни, включително саркоми и лимфоми (5%); тумори от смесени типове - плоскоклетъчен и аденокарцином, аденокарцином и дребноклетъчен и др. (15%)

За точно установяване на хистологичния тип тумор в трудни ситуации, причинени например от малкия размер на пробата или загубата на способността на туморните клетки да образуват специфични структури (ниска степен на диференциация) или да идентифицират някои специфични характеристики на неоплазмата, морфолозите използват имунохистохимично оцветяване (IHC). Този метод се формира в средата на 80-те [2] и веднага се превръща в един от най-популярните в клиничната онкология (фиг. 3). Появата на такъв диагностичен тест например значително промени ролята на патоморфологично изследване при лечението на рак на гърдата: назначаването на ендокринната терапия зависи от резултатите от IHC анализа за естрогенни рецептори (ER) и прогестерон (PgR), които се синтезират от туморни клетки при това заболяване. В момента антагонисти на естрогени, които забавят делението на клетките на рака на гърдата, се приемат от около 70% от пациентите [3]. С помощта на IHC може да се открие и увеличаване на синтеза на онкопротеин HER2 / neu (от английския рецептор на фактора на растеж на човешкия епидермален растеж или трансмембранната рецепторна тирозин киназа). Установено е, че туморите, произвеждащи HER2 / neu, са чувствителни към терапевтичните инхибитори на тази тирозин киназа, а предписването на подходящи лекарства (напр. Трастузумаб) се основава на резултатите от тестове, включително IHC анализ [4].

Фиг. 3. Схема на имунохистохимичния (IHC) метод и примери за неговото приложение. Първичните антитела се свързват с желания антиген (хормон или неговия рецептор) и стават видими под светлинен микроскоп поради връзката с вторични антитела, белязани с ензим, докато активността на пероксидаза се открива, като се използва 3,3-диаминобензидин (DAB). Вдясно са примери за оценка на рецепторния статус на карциномите на гърдата: IHC реакция с антитела към естрогенни рецептори (а - отрицателна реакция, b - ядрено оцветяване, 100% от клетките) и антитела към HER2 / neu (с - оцветяване на мембрана, степен 3+)

Туморна диагностика днес не може да се представи без комбинация от традиционен морфологичен и молекулярно-генетичен анализ. Първите мутации, свързани с туморния отговор към терапията, са открити през последното десетилетие. Вече раковите клиники използват десетки молекулярни тестове, предназначени да персонализират лечението. Доскоро клиничното разделение на всички първични белодробни тумори на дребноклетъчен и недребноклетъчен рак беше достатъчно за определяне на стратегията на лечение. Ситуацията се промени с откриването на активиращи мутации в гена, който кодира рецептора на епидермалния фактор на растежа - EGFR, което направи този онкогенен протеин селективна мишена за действието на лекарствата, инхибитори на EGFR. EGFR мутации обикновено се откриват при пациенти с белодробен аденокарцином. По този начин диференциалната диагноза между аденокарцином и други хистологични типове се превърна в спешна задача. Ядреният протеин TTF-1 е маркер на първичните аденокарциноми [5]. Ако ядрата на раковите клетки показват положително оцветяване (фиг. 4), тогава патологът диагностицира "аденокарцином" и в този случай е препоръчително пациентът да се подложи на молекулярно изследване за наличие на EGFR мутации в тумора..

Фиг. 4. Слабо диференциран белодробен аденокарцином (а, има отделни туморни клетки сред фиброзната тъкан) и положителна IHC реакция с антитяло към TTF-1 в ядрата на туморните клетки (б)

В клинично проучване ефикасността на EGFR инхибитор (гефитиниб) е проучена в първия етап на лечение на пациенти с EGFR мутация [6]. За да включим 25 пациенти в изследването, трябваше да анализираме тъканни проби от повече от 500 пациенти с рак на белия дроб, което е свързано с ниската честота на тази мутация, която не надвишава 6–7% в общата извадка от пациентите. Резултатите от изследването са невероятни: ефектът на лекарството се наблюдава при всички пациенти без изключение, докато един и същ показател за назначаване на стандартна терапия обикновено не е 20-30% (фиг. 5).

Фиг. 5. Намаляване на размера на туморните огнища (%) в отговор на използването на EGFR инхибитор (гефитиниб) при пациенти с активиращи мутации в гена на EGFR: делеция на 19-ти екзон (19del) и заместване в 21-ия екзон (L858R) [6]

В момента патоморфологията претърпява фундаментални промени. Най-новото разбиране на молекулярната патология на раковите клетки е интегрирано в хармонична система от знания, натрупана през десетилетия в рамките на класическата цитология, хистология и патологична анатомия. Всичко това дава основание да се говори за появата на нова дисциплина - молекулярна патология [7]. Много съвременни алгоритми за вземане на медицински решения вече се ръководят не толкова от хистологичните видове рак, колкото от молекулярните характеристики на клетките. Все пак ролята на патолога все още остава водеща, тъй като именно той интегрира цялата получена информация (микроскопична и молекулярна) в общия "портрет" на тумора.

Значението на молекулярната морфология в онкологията ще се увеличи в близко бъдеще, тъй като молекулярната диагностика вече не е еднократно проучване, извършвано само на етапа на диагнозата. Много съвременни технологии за лечение на рак осигуряват мониторинг на характеристиките на туморните клонове през всички етапи на онкологичната медицинска помощ. През това десетилетие методите на "течна биопсия", базирани на идентифицирането на фрагменти от туморни клетки в периферната кръв, станаха много популярни. Друг важен аспект от развитието на морфологията е интегрирането й с различни методи за компютърен анализ и изкуствен интелект. Пред очите ни морфологията на туморите се превръща от сравнително консервативен раздел на онкологията в една от най-динамично развиващите се дисциплини на съвременната медицина..

Тази работа беше подкрепена от Руската фондация за фундаментални изследвания (проект 16-04-00921).

литература
1. Wistuba I., Brambilla E., Noguchi M. Глава 17: Класическа анатомична патология и рак на белия дроб // IASLC Торакална онкология. Pass H. I., Ball D., Scagliotti G. V. (eds) Aurora, Colorado, 2014; 217-240.
2. Taylor C. R., Burns J. Демонстрацията на плазмени клетки и други клетки, съдържащи имуноглобулин, в фиксирани с формалин, в парафин тъкани, използвайки маркирано с пероксидаза антитяло // J. Clin. Pathol. 1974; 27 (1): 14–20.
3. Pertschuk L. P., Tobin E. H., Gaetjens E. et al. Хистохимичен анализ на естрогенни и прогестеронови рецептори при рак на гърдата: корелация с биохимични анализи и реакция на пациентите на ендокринни терапии // Рак. 1980; 46 (12 Suppl): 2896-2901.
4. Pegram M. D., Lipton A., Hayes D. F. et al. Изследване на фаза II на повишена рецепторна химиочувствителност при използване на рекомбинантно хуманизирано анти-p185HER2 / neu моноклонално антитяло плюс цисплатин при пациенти с HER2 / neu-свръхекспресиращ метастатичен рак на гърдата, рефрактерно към химиотерапевтичното лечение // J. Clin. Oncol. 1998; 16: 2659–2671.
5. Stenhouse G., Fyfe N., King G. et al. Тиреоиден транскрипционен фактор 1 при белодробен аденокарцином // J. Clin. Pathol. 2004; 57 (4): 383-387. Doi: 10.1136 / jcp.2003.007138.
6. Moiseyenko V. M., Procenko S. A., Levchenko E. V. et al. Висока ефективност на гефитиниб от първа линия при неазиатски пациенти с белодробен аденокарцином, мутирал EGFR // // Onkologie. 2010; 33 (5): 231-238. DOI: 10.1159 / 000302729.
7. Birner P., Prager G., Streubel B. Молекулярна патология на рака: как да се комуникира с болестта // ESMO Open. 2016; 1 (5): e000085. DOI: 10.1136 / esmoopen-2016-000085.